Solução de problemas
O que o frasco está lhe dizendo.
A maioria dos problemas de reconstituição se anuncia visualmente em até dois minutos. A tabela abaixo relaciona o que você pode observar com a causa mais provável e se o material ainda é utilizável. Quando uma linha diz parar, significa parar: nenhuma quantidade de aquecimento, agitação suave ou espera recupera um peptídeo agregado.
O que você observaCausa mais provávelQuandoAção
Espuma densa na superfície
Solvente lançado diretamente sobre o bolo, ou o frasco foi agitado
Imediato
Deixe assentar, depois gire suavemente
Bolo ainda visível após cinco minutos
Solvente frio, ou uma sequência que precisa de um diluente ácido
Imediato
Deixe atingir a temperatura ambiente, gire novamente
Névoa persistente contra um fundo preto
Agregação — cisalhamento, agitação ou força iônica incorreta
Imediato
Pare, não use
Fibras ou partículas flutuantes contra o fundo branco
Contaminação por partículas ou fragmentos de borracha ("coring")
Imediato
Pare, fotografe, relate
Bolo colapsado ou encolhido na chegada
Falha no ciclo de liofilização ou na vedação a vácuo
Antes do solvente
Não reconstitua, relate
Nenhuma resistência quando a agulha entra
Vácuo perdido durante o transporte
Antes do solvente
Inspecione o bolo primeiro
Precipitado se formando após a refrigeração
Limite de solubilidade excedido a +4 °C
Horas a dias
Reconstitua mais diluído na próxima vez
Solução azul profundo
Quelato de cobre(II) do GHK-Cu — esperado
Imediato
Normal, prossiga
F1
Agitar um frasco reconstituído
A agitação mecânica desnatura peptídeos na interface ar-líquido e produz agregados que não se redissolvem. O dano é invisível até virar névoa, e nesse ponto a sequência já foi alterada. Gire suavemente, deixe em repouso, espere — o bolo se dissolve no seu próprio ritmo.
F2
Ciclos repetidos de congelamento-descongelamento
O congelamento em si é bem tolerado. O ciclo não é: cada descongelamento concentra os solutos na fronteira do gelo em recuo e submete o peptídeo a um ambiente local muito diferente da solução como um todo. Aliquote antes de congelar, descongele uma única vez e descarte o que sobrar.
F3
Reentrar com uma agulha usada
Uma única passagem por um septo encerra a esterilidade da agulha e a torna romba o suficiente para arrancar fragmentos de borracha. Um frasco reentrado com uma agulha usada passa a carregar uma carga microbiana e de partículas desconhecida, o que torna todos os valores analíticos do seu Certificado de Análise inaplicáveis ao que agora está dentro dele.
F4
Um frasco sem rótulo
Um frasco refrigerado sem concentração e sem data escritas nele é material inutilizável, seja o que for que esteja dissolvido dentro. Não há como reconstruir nenhum dos dois valores a partir do próprio frasco, e estimá-los transforma um experimento medido em uma anedota.